ATAC-seq
定義:
ATAC-seq(Assay for Transposase-Accessible Chromatin with high throughput sequencing)是使用高通量測序?qū)?/span>Tn5轉(zhuǎn)座酶易接近性染色質(zhì)區(qū)域進行測序分析的一種表觀遺傳學研究技術。
該技術有兩大特點:(1)轉(zhuǎn)座酶只對開放染色質(zhì)區(qū)域進行切割;(2)轉(zhuǎn)座酶可以同時對切割下來的DNA片段的兩端添加測序接頭。
實驗原理和方法:
(1)收集細胞或組織,制備細胞懸液;
(2)加入細胞膜裂解液,獲得細胞核;
(3)加入Tn5轉(zhuǎn)座酶,對處于開放狀態(tài)的DNA進行酶切;
(4)回收酶切下來的DNA片段,PCR擴增后進行二代高通量測序。
測序參數(shù):illumina/BGI平臺,6G
應用方向:
1. 染色質(zhì)開放性圖譜繪制,注釋全基因組調(diào)控元件;
2. 預測參與調(diào)控生物學過程的轉(zhuǎn)錄因子;
結果示例:
(1)全基因組開放性區(qū)域圖譜分析
不同樣本間基因活性調(diào)控序列圖譜
(2)motif分析預測轉(zhuǎn)錄因子結合蛋白
(3)ATAC-seq與RNA-seq聯(lián)合分析
基因結構開放狀態(tài)與基因表達水平關聯(lián)分析
樣本準備: